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山东科技大学学报论文范文参考


所属栏目:经济科学论文
发布时间:2013-11-30 15:23:06  更新时间:2013-11-30 14:03:59

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  胡氏湿疹清凉喷雾剂是由栀子、大血藤、牡丹皮等6味中药组成的喷雾剂,具有胡氏湿疹清凉喷雾剂具有清热解毒、败毒散痈、活血消肿等功效,临床上主于治疗湿疹、神经性皮炎、荨麻疹、牛皮癣等疾病。胡氏湿疹清凉喷雾剂虽然已经应用于临床,但缺乏质量标准研究,不利于胡氏湿疹清凉喷雾剂的应用与推广。

  摘要:目的:建立胡氏湿疹清凉喷雾剂的质量标准。方法:采用薄层色谱法对方中栀子、大血藤、牡丹皮进行鉴别;采用高效液相色谱法测定了胡氏湿疹清凉喷雾剂中栀子苷的含量,采用DiamonsilTM(钻石)C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相:乙腈-水(15∶85);检测波长:238nm;流速:1mL/min;柱温:25℃。结果:薄层色谱中均能检出栀子、大血藤、牡丹皮;栀子苷在6.4~57.6μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为99.42%,RSD为1.57%(n=9)。结论:本方法快速、简便、准确、重复性好,可用于胡氏湿疹清凉喷雾剂的质量控制。

  关键词:胡氏湿疹清凉喷雾剂,薄层色谱,高效液相色谱,栀子苷

  为了更好地控制产品质量,保证疗效,本文应用薄层层析法对方中栀子、大血藤和牡丹皮进行鉴别研究,并以方中君药栀子中的栀子苷含量为指标,采用高效液相色谱法测定了胡氏湿疹清凉喷雾剂中栀子苷的含量,建立了本品的质量标准。

  1仪器与试药

  1.1仪器

  美国安捷伦Agilent1100高效液相色谱仪;DAD检测器,Agilent1100色谱工作站;XS205型电子天平(瑞士梅特公司);HS10260D型超声波清洗器(70KW,40KHz)(天津奥泰公司)。

  1.2试药

  氏湿疹清凉喷雾剂(贵州贵定胡三帖药械有限责任公司提供,批号:20060612、20060716、20060811);栀子苷对照品、栀子对照药材、大血藤对照药材、丹皮酚对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110756-200410供含量测定用、0986-200002、121353-200401、0708-9704供含量测定用);.硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂);水为超纯水,甲醇为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

  2方法与结果

  2.1鉴别实验

  2.1.1栀子的薄层色谱鉴别〔1〕取本品10片,挤出药液吸取本品10mL,挥干溶剂,加50%甲醇20mL,超声40min,滤过,滤液浓缩至约1mL,作为供试品溶液。取栀子苷对照品,加甲醇制成每1mL含4mg的溶液作为对照品溶液。取栀子对照药材粉末1g,同法法制成对照药材溶液。按处方比例去除栀子药材,按本品的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述4种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G板上,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(5∶5∶1∶1)为展开剂,展开,展距14.7cm。取出,晾干,喷以50%的硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材和对照品色谱相应的位置上显相同的紫色斑点,阴性对照无干扰。

  2.1.2大血藤的薄层色谱鉴别〔2〕取本品10片,挤出药液吸取本品20mL,挥干溶剂,加甲醇50mL,超声30min,滤过,滤液蒸干,残渣加2%氢氧化钠溶液10mL使溶解,用盐酸调节pH值至2,用乙醚振荡提取3次,每次10mL,合并乙醚液,挥干,残渣加甲醇2mL使溶解,作为供试品溶液。取大血藤对照药材粉末5g,同法制成对照药材溶液。按处方比例去除大血藤药材,按胡氏湿疹清凉喷雾剂的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述3种溶液各2μL,分别点于同一硅胶G板上,以三氯甲烷-丙酮-甲酸(8∶1∶0.8)为展开剂,展开,展距13.9cm。取出,晾干,喷以2%的三氯化铁乙醇溶液。供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上显相同的紫红色斑点,阴性对照无干扰。2.1.3牡丹皮的薄层色谱鉴别〔3〕取本品10片,挤出药液吸取本品10mL,挥干溶剂,加乙醚10mL,密塞,振摇10min,滤过,滤液蒸干,残渣加丙酮2mL使溶解,作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品,加丙酮制成每1mL含5mg的溶液,作为对照品溶液。按处方比例去除牡丹皮药材,按胡氏湿疹清凉喷雾剂的制备工艺和供试品溶液的制备方法制成阴性对照品溶液。照薄层色谱法实验,吸取上述3种溶液各10μL,分别点于同一硅胶G板上,以环己烷-乙酸乙酯(3∶1)为展开剂,展开,展距14.1cm。取出,晾干,喷以5%的三氯化铁乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上显相同的蓝褐色斑点,阴性对照无干扰。

  2.2含量测定

  2.2.1色谱条件DikmaDiamonsilTM(钻石)C18柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相:乙腈-水(15∶85);柱温:25℃;检测波长:238nm;流速:1mL/min;进样量:10μL;理论塔板数以栀子苷峰面积计算应大于3000。

  2.2.2对照品溶液的制备精密称栀子苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含栀子苷0.32mg的溶液,即得。

  2.2.3供试品溶液的制备取本品10片,挤出药液精密吸取10mL,置具塞锥形瓶中,挥干溶剂,精密加入甲醇25mL,称定重量,超声处理(功率70W,频率40KHZ)20分钟,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液10mL,置25mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。按处方中药味的比例,自制不含栀子的处方按其工艺制成阴性样品,同法制备,即得。

  2.2.4系统适应性试验分别吸取栀子苷对照品溶液、供试品溶液及缺栀子的阴性对照液注入液相色谱仪,记录色谱图(图1)从图中可见,在本试验条件下,栀子苷对照品的出峰时间为16.01分钟,栀子苷峰与相近的其他成分峰分离完全(分离度大于1.5),阴性样品无干扰。结果见图1。

  2.2.5线性关系考察取对照品溶液分别配制成含栀子苷6.4、19.2、32、44.8、57.6μg/mL的溶液;进样10μL,,以峰面积(Y)为纵坐标,对照品量(C)为横坐标绘制标准曲线,计算得线性方绘制标准曲线,得回归方程Y=43.113C-15.06,r=0.9999。结果表明,栀子苷在0.064~0.576μg范围内呈现良好的线性关系。

  2.2.6精密度试验取在线性范围的栀子苷对照品溶液,按“2.2.1测定法”项下方法重复进样6次。结果栀子苷峰面积RSD为0.68%,说明本法精密度良好。

  2.2.7稳定性试验取同一批号样品按“2.2.3供试品溶液的制备”项下方法制成供试品溶液,按“2.2.1测定法”项下条件分别在制备后0,2,4,6,8,10h测定一次峰面积。结果栀子苷峰面积RSD为1.37%,说明供试品溶液在10小时内稳定。

  2.2.8重复性试验取同一批号样品6份,按“2.2.3供试品溶液的制备”项下方法制成供试品溶液,并按“2.2.1测定法”项下条件进行测定,计算栀子苷的含量。结果供试品溶液中栀子苷的平均含量为0.2018mg/mL,RSD为1.53%,说明本法重复性良好。2.2.9加样回收率试验取已知含量的同一批号样品9份,精密量取本品5mL,分别加入适量的栀子苷对照品0.860mg、1.032mg、1.204mg,按“2.2.3供试品溶液的制备”项下方法制成供试品溶液,并按“2.2.1色谱条件”项下的条件进行测定,计算回收率。结果见表1。

  2.2.10样品的含量测定按“2.2.3供试品溶液的制备”项下的制备方法分别处理10批样品,按“2.2.1测定法”项下条件进行含量测定。结果见表2。

  根据10批样品的含量测定结果;暂定本品每毫升含栀子以栀子苷计不得少于0.18mg。

  3讨论

  3.1本实验含量测定供试品溶液的制备中比较了回流提取法、超声提取法、索氏提取法。实验结果表明,回流提取法提取出的成分复杂,杂质干扰多,索氏提取法操作繁琐、费时、超声提取法操作简便、杂质干扰少,省时且提取率高,所以选择超声提取法进行提取〔4〕。

  3.2在色谱柱的选择中,主要考察了依利特HypersilODS色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),DiamonsilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)及ShimadzuC18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),在相同色谱条件下测试,结果显示,DiamonsilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)的分离最好。

  3.3本实验以乙腈-水(15∶85),甲醇-1.15﹪冰醋酸(11∶89),甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(15∶85∶1∶0.3)为流动相,分别考察了色谱的分离情况,结果表明以乙腈-水(15∶85)为流动相时,栀子苷色谱峰出峰时间短,分离效果最佳。

  3.4实验结果表明,采用TLC法可检出胡氏湿疹清凉喷雾剂中栀子、大血藤、牡丹皮,方法简便、阴性样品无干扰,专属性强,可作为本品的定性鉴别方法。采用HPLC法测定胡氏湿疹清凉喷雾剂中栀子苷的含量,方法简便,重复性、稳定性好,结果准确可靠,可作为本品的含量控制方法。

  参考文献

  〔1〕中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典2005年版(一部)〔S〕.北京:化学工业出版社,2005:173.

  〔2〕中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典2005年版(一部)〔S〕.北京:化学工业出版社,2005:15.

  〔3〕中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典2005年版(一部)〔S〕.北京:化学工业出版社,2005:119.

  〔4〕黄雪梅,蒙大平.RP-HPLC测定龙胆泻肝口服液中栀子苷的含量〔J〕.中成药,2001,23(7):489-491.



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