农业科技论文3种生物农药的毒性及安全评价

　　摘要：通过测定5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、30%茶皂素AS、1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP3种生物农药对蜜蜂、鹌鹑、斑马鱼和家蚕的急性毒性，对其进行环境安全评价。结果表明，5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP对蜜蜂、鹌鹑、斑马鱼和家蚕的LD50或LC50均高于检测上限，为低毒级农药；30%茶皂素AS对蜜蜂、鹌鹑和斑马鱼为低毒级，对家蚕的LC50（96h）为114a.i.mg/L，为中毒级。试验可为这3种生物农药的合理使用提供科学依据。

　　关键词：甜菜夜蛾多角体病毒,枯草芽孢杆菌,茶皂素,非靶标生物,毒性,环境安全评价,农业科技论文

　　随着人民生活水平提高和环保意识的增强，农药对环境和有益生物的影响逐渐受到关注。本研究选择5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、30%茶皂素AS和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP，分别代表昆虫病毒、植物代谢产物和细菌3种不同类型的生物农药进行相关试验，通过测定甜菜夜蛾多角体病毒、枯草芽孢杆菌和茶皂素3种生物农药对蜂、鸟、鱼、蚕4种非靶标生物的毒性，为研究生物农药对环境的影响提供依据。

　　1材料与方法

　　1.1供试药剂

　　5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC，武汉武大绿洲生物技术有限公司提供；30%茶皂素AS，武汉信风作物科学有限公司提供；1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP，武汉天惠生物工程有限公司提供。试验时用蒸馏水稀释成所需浓度。

　　1.2供试生物

　　意大利蜜蜂（ApismelliferaL.）由武汉市蔬菜科学研究所提供，成年工蜂，健康，蜂龄一致；鹌鹑（Coturnixjaponica）由武汉市新洲汪集鹌鹑养殖场提供，30日龄，体重90～100g，健康，活泼，雌雄各半；斑马鱼（Brachydaniorerio）由中国科学院水生生物研究所提供，体长1.5～3.0cm，体重0.2～0.4g，健康无病，试验前在室内驯养7d，死亡率小于5%；家蚕（Bombyxmori）由西南大学提供，品种为两广2号，2龄起蚕。

　　1.3试验方法

　　1.3.13种生物农药对蜜蜂的毒性测定

　　1）急性接触毒性测定。以蒸馏水为溶剂，将5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、30%茶皂素AS和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP配制成不同浓度的药液，将贮蜂笼内的蜜蜂引入500mL三角瓶内，用纱布封口，通入N2气体将蜜蜂麻醉后置于滤纸上，用微量移液器分别将配好的系列浓度药液点滴于蜜蜂前胸背板处，点滴量为1μL/只，待蜂身晾干后转入试验笼中，用脱脂棉浸泡适量蔗糖水正常条件下饲养。以清水点滴为空白对照，记录中毒症状及24、48h的死亡数[3]。

　　2）急性经口毒性测定。将贮蜂笼内的蜜蜂引入试验笼中，每笼20只。不同浓度药液与蜂蜜以2∶1（体积比）混匀，制成药饵，装入10mL小烧杯中，杯内浸渍0.3g脱脂棉，杯口向下倒置于试验笼纱网上，通过网眼供蜜蜂摄食。以清水与蜂蜜2∶1（体积比）混匀饲喂为对照，记录24、48h死亡数[3]。

　　1.3.23种生物农药对鸟类的毒性测定鹌鹑试验前24h停止喂食，仅供清水。试验采用经口灌注法，用灌胃器一次性给药1.0mL/100g体重，以清水灌注为空白对照。然后以正常条件饲养，观察记录鹌鹑的中毒症状和死亡率[4]。

　　1.3.33种生物农药对鱼类的毒性测定试验用水为经存放曝气处理24h以上的自来水，加入生物农药，测定溶解氧和pH确定适合斑马鱼生存。试验采用半静态法，每24h换水1次，观察鱼中毒症状，及时清除死鱼，以不加药相同水源为对照，记录24、48、72、96h的死亡数[5]。

　　1.3.43种生物农药对家蚕的毒性测定试验采用浸叶法，用不同浓度的药液浸渍桑叶10s后晾干加入供试蚕。以浸渍清水的桑叶饲喂为对照，记录24、48、72、96h的家蚕中毒症状及死亡情况[6]。

　　1.4数据处理

　　运用统计软件DPS3.01辅助进行数据处理，计算毒力回归方程、致死中剂量（LD50）或致死中浓度（LC50）、95%置信限。

　　2结果与分析

　　2.13种农药对蜜蜂的毒性

　　急性接触毒性试验结果（表1）表明，用5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP和30%茶皂素AS在试验浓度范围内点滴蜜蜂，48h内蜜蜂无明显中毒症状，3种农药的LD50（24h）和LD50（48h）均高于100a.i.μg/只，依据中华人民共和国环境保护部发布的《化学农药环境安全评价试验准则》，确定5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP和30%茶皂素AS对蜜蜂的触杀毒性为低毒。

　　急性经口毒性试验结果（表2）表明，供试蜜蜂在试验浓度范围内，48h无明显中毒症状，3种农药对蜜蜂的LC50均高于2000a.i.mg/L，根据中华人民共和国环境保护部发布的《化学农药环境安全评价试验准则》，确定3种农药对蜜蜂的胃毒毒性为低毒。

　　2.23种农药对鸟的毒性

　　试验鹌鹑经口注入3种农药后，对照组的鹌鹑和低浓度组的鹌鹑无明显中毒症状；高浓度组个别鹌鹑有聚堆、卧伏及呼吸急促现象，但能在8～10h恢复正常，无一死亡。3种农药对鹌鹑的LD50均高于1000a.i.mg/kg体重（表3），根据中华人民共和国环境保护部发布的《化学农药环境安全评价试验准则》，确定3种农药对鸟类属于低毒级农药。2.33种农药对鱼的毒性

　　斑马鱼接触甜菜夜蛾多角体病毒和枯草芽孢杆菌试液后，无明显中毒症状，全部试验的斑马鱼均无死亡，LC50均大于100a.i.mg/L；斑马鱼接触茶皂素试液后，在较高浓度组中，表现出行动迟缓、侧翻沉底和浮于水面等中毒症状，并有死亡，茶皂素对斑马鱼的LC50（96h）为29a.i.mg/L（表4）。根据中华人民共和国环境保护部发布的《化学农药环境安全评价试验准则》，大于10a.i.mg/L为低毒，由此确定5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC、30%茶皂素AS和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP对鱼类的急性毒性为低毒。

　　2.43种农药对家蚕的毒性

　　观察结果表明，家蚕饲喂30%茶皂素AS处理后的药叶，高浓度组家蚕出现拒食、足突出、蚕体绵软发白等现象，多数家蚕挺直静卧，直至死亡。根据不同浓度组家蚕的死亡率，计算得出30%茶皂素AS对家蚕的LC50（96h）为114a.i.mg/L；当染毒浓度为2000a.i.mg/L时，5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP处理家蚕在96h内无死亡和中毒症状，确定2种农药剂型对家蚕急性毒性LC50（96h）大于2000a.i.mg/L（表5）。根据中华人民共和国环境保护部发布的《化学农药环境安全评价试验准则》确定30%茶皂素AS对家蚕为中毒级，5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP对家蚕为低毒级农药。

　　3小结与讨论

　　本研究结果表明，5亿PIB/g甜菜夜蛾多角体病毒SC和1×1011个/g枯草芽孢杆菌WP对蜜蜂、鸟类、鱼类和家蚕为低毒级农药，对环境较为友好；30%茶皂素AS对蜜蜂、鸟类和鱼类为低毒级农药，对家蚕毒力表现为中毒，因此在田间使用时应尽量远离桑园，勿在桑园的上风向使用，防止因药雾飘散、沉降至桑叶上而影响家蚕养殖。

　　参考文献：

　　[1]华乃震，华纯.生物杀虫剂的进展和应用[J].农药，2011（7）：469-473.

　　[2]刘淑娟.生物农药与生态环境保护[J].泰安师专学报，2002，24（6）：74-75.

　　[3]吴声敢，王强，赵学平，等.毒死蜱和甲氰菊酯对蜜蜂毒性与安全评价研究[J].农药科学与管理，2004（1）：14-16，21.

　　[4]杨佩芝，蒋新明，蔡道基.化学农药对禽鸟的毒性与评价[J].农村生态环境，1986（3）：8-11，37.

　　[5]蔡道基，汪竞立，杨佩芝，等.农药对鱼类的毒性与评价的初步研究[J].农村生态环境，1987（2）：7-11.